王皇後知道竇太後在宮中有舉足輕重的地位，所以她一個勁地奉承著竇太後。竇太後很高興新皇後對她這麼孝敬，就叫漢景帝封王皇後的哥哥王信為侯。
誰知周亞夫又出來反對，他對景帝說：“高皇帝有約在先：‘沒有功勞的人不得封侯’。雖然王信是王皇後的兄長，但他可什麼功勞都沒有，所以不應該封他。”景帝見他總是不能順著自己的心思，心里很不痛快。但這話在理，他又不得不聽，所以王信和王皇後白忙了一陣，什麼也沒得到，他們在心里把周亞夫恨得透透的。
竇太後一心想讓王信成為侯爺，還有另外的原因。原來梁王劉武殺袁盎闖下大禍之後，由于田叔燒掉了證據而沒被追究。當時王信為了討竇太後的好，竭力在景帝面前替梁王說好話。景帝不追究梁王，王信在其中也出了大力。竇太後對王信十分感激。梁王劉武親自去向王信致謝，一來二去，這兩人倒成了朋友，他們一勾結起來，周亞夫可就要大禍臨頭了。
這時候，恰好有匈奴王徐盧等六人從匈奴那邊投降漢朝。景帝為了鼓勵那些已經投降匈奴的漢人回到中原來，決定把徐盧等人都封為侯。
周亞夫又表示反對，他對景帝說：“叛逆的人應當辦罪，皇上怎能封他們為侯呢?匈奴的臣下背叛了他們的君王過來投降，就是不忠。臣下不忠，投降敵國，皇上給這樣的人封侯，將來皇上還怎麼能勉勵忠臣呢?”
漢景帝一聽這話，才知道周亞夫是個不聽話的主兒。他覺得周亞夫的話太偏激，就對周亞夫說：“丞相這話不合時宜，朕不能接受。”在景帝的執意堅持下，徐盧等六人都被封侯。
周亞夫見自己屢諫不納，知道自己已經失寵，就推說有病，請求辭職。
竇太後、王皇後和王信等人求之不得，馬上在漢景帝面前說周亞夫的壞話。竇太後說：“孝文皇帝在細柳營犒軍的時候，周亞夫的態度就很傲慢，讓文皇帝聽他的指揮，真是狂妄到了極點，這樣不聽話的人留在朝里早晚是個禍害。”
漢景帝看這麼多人對周亞夫有意見，自己也討厭周亞夫老是跟他頂著干，他樂得耳根清靜，就同意了周亞夫的辭職請求。
過了一段時間，景帝念周亞夫過去立有大功，就想再起用他。景帝想先觀察一下，看看周亞夫是不是肯聽他的話。景帝以為這段時間周亞夫被削去官職，頭腦能冷靜一些。
景帝令內侍去召周亞夫進宮，隨便問了他幾句生活近況。寒暄過後，景帝就讓他留在宮中用飯。
席上沒有別人，只有景帝、周亞夫和作陪的皇太子劉徹。禦廚擺上酒菜，擱在周亞夫面前的是一大塊煮爛了的肥肉，沒有別的菜，連筷子都沒有。
景帝笑眯眯地請周亞夫用餐，周亞夫認為這是成心開玩笑，就上火了，他回過頭來呵叱一旁的內侍說：“拿筷子來。”
左右內侍早已得了景帝的話，不許亂動。他們當做沒有聽見，仍然靜靜地站在一邊。周亞夫正想發作，漢景帝仍然笑著說：“怎麼這麼大脾氣呀，朕這樣請你，你還不滿意嗎?”周亞夫聽出話外有音，忙摘了帽子，趴在地上，向漢景帝叩頭請罪。
皇太子劉徹一直在席上坐著，他知道周亞夫是他將來繼承皇位的一大障礙，自己也早想借其父景帝之手除去他。劉徹見周亞夫坐在席上，面有怨色，就一直盯著他看。周亞夫被他看得實在受不住了，他起身告辭，頭也不回地出了宮門。
景帝不解地問劉徹說：“皇兒為何總是目不轉睛地看著他?”
劉徹認為時機已到，就面帶愁容地回答說：“這個人在父皇面前都這樣囂張，將來必定會出亂子。”景帝笑著拍拍劉徹的肩膀對他說：“他這樣子怏怏不服，朕是不能讓他做你的臣子的。”這以後景帝就有除去周亞夫的心思。
不久之後，周亞夫的兒子為了准備老父死後殉葬用的東西，向營造署購買作廢處理的盔甲盾牌五百件，命人搬運回去。他仗著父親的權勢，不給搬運者工錢，這些人怨恨之至，到官府檢舉周家私藏兵器。事發之後，自然牽連到周亞夫。景帝一看抓住了周亞夫的把柄，馬上來了精神，他下令廷尉審理這個案子。